分子生物学与基因工程实验教程（高等院校生命科学与技术实验教材） pdf snb 115盘 kindle 在线 下载 pmlz mobi

　　《分子生物学与基因工程实验教程》由两大部分十大实验组成，包括质粒提取、核酸回收、载体连接、PCR进行克隆鉴定、SDS-PAGE以及Westernblot等。在系统进行一个基因克隆的同时让学生全面掌握质粒、限制性内切酶、连接酶、感受态、转化PCR、重组蛋白表达及鉴定等基本操作；从而使学生巩固基因工程学理论知识，并为将来进一步学习打下技术基础。

第1部分基因工程实验

实验1重组质粒pcdna3．0-arrb的提取，质量检测及酶切分析

1．1质粒提取

1．2质粒质量检测

1．3质粒酶切

1．4琼脂糖凝胶电泳检测

实验2用琼脂糖凝胶电泳进行目的dna片段的回收及质量检测

1．1用琼脂糖凝胶电泳进行目的dna片段的分离

1．2从凝胶中回收目的dna片段

1．3 dna片段浓度及纯度检测

实验3目的dna片段与载体连接，感受态制备及连接产物的转化

1．1连接反应

1．2感受态制备

1．3连接产物转化感受态细菌

实验4pcr鉴定细菌克隆

1．1 pcr鉴定克隆

1．2琼脂糖凝胶电泳

实验5 sds-page电泳及考马斯亮蓝染色分析目的蛋白的表达

1．1电泳胶的制备

.1．2蛋白样品制备及sds-page电泳

1．3转膜

1．4考马斯亮蓝染色

实验6 western blot分析目的蛋白的表达

1．1 sds-page电泳

1．2转膜

1．3封闭

1．4一抗孵育

1．5二抗孵育

1．6显色

第2部分分子生物学实验

实验7大肠杆菌基因组dna的提取与定量

实验8大肠杆菌生物素连接酶基因的rcr扩增及扩增产物的鉴定

实验9小鼠肝组织中总rna的提取

实验10逆转录-聚合酶链反应(rt-pcr)

附录材料

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